兰花无菌播种繁殖法简介 [复制链接]

兰花无菌播种繁殖法一般要有专门的实验室,操作比较复杂,这里仅作最简单的流程介绍。

1.兰花无菌播种繁殖法就是利用无菌培养基进行播种繁殖。其核心要求是无菌。

2.培养基配方。有各种不同配方,例如Knudsonsol.N培养基组成如下：

硝酸钙Ca(NO3)2?4H2O1.00克

硫酸铵(NH4)2SO40.50克

磷酸二氢钾KH2PO40.25克

硫酸镁MgSO4?7H2O0.05克

硫酸亚铁FeSO4?7H2O0.05克

洋菜15克

蔗糖20克

蒸馏水毫升

H＝5.1

3.培养基消*：将各种成分用天平秤好，倒入烧杯中，煮沸，溶解。测其酸碱度并加以调节，使适合于要求之值。溶解后之培养液注入瓶中或管内，用棉花塞住瓶口，然后再放入高压蒸气消*锅内消*。在每一平方厘米1.2公斤的压力之下，消*20分钟即可，时间不可过长，否则洋菜将失去凝固性。在消*时，其他用具也应一并放入锅内消*。经高压消*之后，将玻管或瓶取出，放在清洁之处，并使其呈30度左右的斜面冷却凝固。然后在无菌工作室及无菌接种箱内进行接种，室内用0.1%的酒石酸溶液喷射，使空气中的菌类孢子及尘类附于水汽而降落地面，另用2%的硫酸铜溶液或4%的福尔马林溶液撒抹无菌接种箱的内壁周围，并用A的紫外线灯照射1-2小时，使室内彻底灭菌。

4.种子消*：种子般采用过氧化氢（即双氧水H2O2）3%的溶液浸泡20分钟，然后播入培养基内。

5播种：播种应在无菌工作室中的无菌接种箱内进行。先将经过消*的种子用白金针挑入培养基内（白金针应先在酒精灯火焰上烧红消*，待冷却后方可使用），如种子数量不多，则可将种子直接倒入培养基内。如果种子很小，可用粗的注射器，以打针注射的方式把种子注射到玻管内。应当注意，如果用3%的过氧化氢水和种子同时注入培养基内，过氧化氢的量不能太多，因为太多了可能有二种坏处：第一，溶液过多，往往因玻管倾斜时使溶液流入棉塞之内，以致引起霉菌由棉塞入侵。第二，过氧化氢水过多，势将长期保留在玻管内，时间一长可能使萌发的嫩芽遭受药害。但对于干旱季节过长地区，过氧化氢水也不能过少，否则培养基易于干涸、收缩影响发芽。

6.种子发芽与幼苗管理：(待续)